尼康显微镜的CCD分辨率

2016-05-11技术资料

CCD的Zui终分辨率的光电二极管的数量和它们的大小,相对于由光学显微镜投射到芯片的表面上的图像的功能。 当试图匹配显微镜光学拆分到特定的数字摄像头,使用该计算器,以确定所需的像素密度,以充分从显微镜捕获的所有数据。

操作教程,首先选择感兴趣的使用物镜下拉菜单客观的光学像差校正系数。 下一步,选择从放大的下拉菜单中选择放大倍数/数值孔径的组合。 之后这些选择是由,像素计算器将自动进行必要的计算,以在对CCD摄像机的像素所需数量的到达。 这个值将被显示在粉红色的数据中,在教程窗口的底部标有Zui低要求的像素(百万)。 在计算中所用的其它重要参数的中间值被显示在位于下拉菜单和粉红色数据框之间的蓝灰色的数据框。

只能实现成像的尼康显微镜的光学元件的检体的足够的分辨率,如果至少两个样本的每个分辨单元作出的,虽然许多研究者倾向于每解析单元3的样品,以保证有足够的采样。 在衍射受限的光学仪器,如显微镜中,在550纳米的平均波长的光学分辨率的阿贝极限是0.22微米,使用具有1.4的数值孔径的物镜时。 在这种情况下,11×11微米的传感器尺寸都只是足够大,以允许要被匹配的光学和电子的分辨率,具有7×7微米的传感器尺寸优选的。 虽然在一个CCD的小型传感器提高了空间分辨率,还限制了装置的动态范围。

下面的计算中,基于对580纳米的平均照射波长,被用于制造这种交互式Flash教程。 显微镜物镜被假定为具有40倍的放大系数在0.95(计划复消色差的优质干物镜)的数值孔径值。

光学分辨率(R)=λ/(NA(物镜)+ NA(聚光镜))

在物镜和聚光器的数值孔径相匹配,并等于0.95的值,并且使用580纳米(0.58微米)的平均波长的值的系统,该溶液变为:

光学分辨率(R)= 0.58 /(0.95 + 0.95)= 0.305 um

图像尺寸投射到CCD检测器的表面等于所述光学分辨率乘以物镜的放大倍率:

CCD图像尺寸 =光学分辨率(R)×总倍率(M)

在这些计算中所使用的物镜,是一个40倍的平场复消色差透镜具有0.95的数值孔径。 因此,图像尺寸投射到CCD表面是:

CCD图像尺寸= 0.305×40 = 12.21 um=0.01221 mm

要转换的图像尺寸投射到CCD表面(0.01221毫米)为每毫米的线对,我们把投影尺寸的倒数:

线对/毫米= 1/CCD图像尺寸 = 81.90

每毫米的线对可以通过垂直CCD尺寸乘以这个量(在此情况下,6.4毫米),次系数2被转换成等效的电视线:

电视线= LP /毫米×垂直CCD尺寸×2 = 81.90 X 6.4 X 2 = 1048.3

CCD的Zui大分辨率,现在可以通过由CCD纵横比(5/4或1.25对于这个例子)相乘的电视线的数目来计算。

CCDZui大分辨率=电视线X长宽比= 1048.3×1.25 = 1310.3

Zui后,需要匹配的显微镜装置的光学分辨率的像素的Zui小数目可通过乘以电视线倍CCD的Zui大分辨率的数目来计算。

Zui低像素要求=电视线X CCDZui大分辨率= 1400000

从系列以上进行,一个40倍的平场复消色差物镜具有0.95的数值孔径和580纳米的波长照射,有必要从显微镜获得Zui大的光数据的像素数操作的计算是140万。 此值属于符合目前的显微镜制造商或售后插件提供了许多数码相机的分辨能力。